- 郑文月;马季;臧海英;冯清蓝;王维佳;米次仁;邓成成;朱定衡;
目的 探讨不同间隔周期浅层X射线照射对人瘢痕疙瘩成纤维细胞及细胞外基质胶原蛋白表达的影响,确认最适辐照间隔时间。方法 收集切除的瘢痕疙瘩组织分离培养原代瘢痕疙瘩成纤维细胞,实验组进行不同时间间隔(1、2、3、4、5、6、7 d)浅层X射线照射,总剂量均为15 Gy。采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)与Western blot检测细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的相对表达,ELISA检测细胞外上清Ⅰ型胶原蛋白改变,初步验证浅层X射线治疗瘢痕疙瘩的最适辐照时间间隔。对照组与不同间隔周期浅层X射线照射组Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白含量的比较采用单因素方差分析;各组间Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA下降量比值行独立样本t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 与对照组相比,不同时间间隔浅层X射线处理后瘢痕疙瘩成纤维细胞内Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达水平在间隔3 d(t=12.09,P<0.01)出现低峰值,Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。间隔3 d mRNA水平检测成纤维细胞内Ⅰ型胶原蛋白与Ⅲ型胶原蛋白的比值下降最明显,差异有统计学意义(t=6.67,P<0.01)。除间隔7 d外,各实验组HKF细胞中Ⅰ型胶原蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),在间隔1 d(t=9.97,P<0.01)出现低峰值;而HKF细胞中Ⅲ型胶原蛋白水平与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。Ⅰ型胶原蛋白/Ⅲ型胶原蛋白比值在间隔前3 d逐渐升高,而间隔5 d(t=0.21,P>0.05)和间隔7 d(t=0.66,P>0.05)差异无统计学意义。所有实验组ELISA检测细胞外上清Ⅰ型胶原蛋白表达均下降(P<0.05)。间隔7 d照射组细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及细胞外上清Ⅰ型胶原蛋白表达均出现胶原分泌回升趋势。结论 照射间隔控制在3 d内能显著降低胶原蛋白的表达,对临床制定放射治疗方案具有重要意义。
2022年04期 v.29;No.145 285-290页 [查看摘要][在线阅读][下载 246K] [下载次数:257 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:1 ] - 韩昭;高艳玲;李志锋;张建忠;张伶;刘钊;徐艳艳;李小静;
目的 通过建立肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)自噬水平改变对与之共培养的A375细胞的体系,进一步明确TAMs自噬在调控A375细胞上皮间质转化(EMT)及迁移侵袭过程中的作用。方法 用PMA和IL-4相继作用于人单核细胞THP-1 72 h诱导其成M2型,流式细胞术及免疫荧光检测鉴定M2表面CD68、CD204、CD206等标志性分子表达情况,鉴定TAMs极化效率。用自噬调节剂雷帕霉素干预TAMs(M2) 24 h,去除自噬调节药物的干预48 h后,通过蛋白免疫印迹方法以及免疫荧光检测各组细胞LC3-Ⅱ和Beclin-1表达,确定药物干预后的TAMs自噬水平。将雷帕霉素干预后的TAMs与人黑素瘤A375细胞进行非接触共培养,48 h后加入不同浓度TanⅡA 1 mg/L(低浓度)组、4 mg/L(高浓度)组,继续培养48 h后,Western blot检测A375细胞EMT相关因子的表达,并通过transwell检测A375细胞的侵袭和迁移能力。结果 人单核细胞THP-1经PMA和IL-4先后作用共72 h后,细胞状态由半悬浮变为贴壁,经流式细胞术、免疫荧光检测发现M2表面CD68、CD204、CD206的表达较M0组明显增强,差异具有统计学意义(均P<0.05)。用自噬调节剂雷帕霉素干预TAMs 24 h后,免疫荧光、Western blot检测显示,LC3-Ⅱ及Beclin-1的表达明显上调,差异具有统计学意义(均P<0.05)。TAMs和A375细胞非接触共培养48 h后,不同浓度的TanⅡA作用于细胞,Western Blot检测显示,相对于空白组,TanⅡA低浓度组和高浓度组Beclin1、LC3-Ⅱ和E-cadherin蛋白表达均显著升高,N-cadherin蛋白表达均显著降低,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。transwell实验显示,TanⅡA低浓度组和TanⅡA高浓度组处理后的A375细胞,其迁移、侵袭能力均有所下降,组间差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 雷帕霉素可以诱导TAMs发生自噬,TanⅡA可以抑制自噬TAMs与之共培养的黑素瘤A375细胞的EMT过程,从而抑制其侵袭和转移。
2022年04期 v.29;No.145 291-298页 [查看摘要][在线阅读][下载 360K] [下载次数:695 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:1 ] - 郑雯;钟亚丹;王炫;刘慧婷;杨斌;刘军;
目的 利用CRISPR/Cas9技术构建一种keratin 5-IRES-eGFP敲入的人胚胎干细胞(hESCs)系,为研究表皮基底角质形成细胞异常的皮肤病提供一种细胞模型。方法 构建针对目的基因keratin 5的sgRNA质粒及打靶Donor质粒,利用CRISPR/Cas9技术完成对keratin 5的定向切割,将IRES-eGFP敲入至keratin 5终止密码子上游,诱导hESCs分化为表达绿色荧光蛋白(GFP)的基底层角质形成细胞。结果 PCR及Sanger测序结果表明IRES-eGFP成功整合至hESCs细胞系的keratin 5终止密码子上游,分化培养后观察细胞形态与角质形成细胞系HaCat形态一致。免疫荧光染色验证hESCs分化获得的ES-KC细胞系稳定表达GFP与keratin 5。结论 成功制备了keratin 5-IRES-eGFP敲入的hESCs细胞系,并诱导hESCs成功分化出带有绿色荧光蛋白标记的基底层角质形成细胞。
2022年04期 v.29;No.145 299-304页 [查看摘要][在线阅读][下载 333K] [下载次数:209 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 刘佳;魏明;
目的 研究PI3K和Notch信号途径在寻常型银屑病患者外周静脉血CD4~+ T细胞增殖、活化中的影响。方法 采集28例寻常型银屑病患者和28例健康对照外周静脉血,采用免疫磁珠法分选外周血CD4~+ T细胞。将寻常型银屑病患者外周血CD4~+ T细胞分为4组:空白对照组,10μmol/L PI3K阻滞剂组(LY294002组),25μmol/L Notch阻滞剂组(DAPT组),10μmol/L LY294002+25μmol/L DAPT组(LY294002+DAPT组)。均分别用植物血凝素(PHA)10μg/mL和IL-2 1 000 U/mL刺激增殖6 h,采用FCM检测CD4~+ T细胞内的CyclinA、Cyclin D1及P27~(kipl)细胞周期蛋白水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Cyclin A、Cyclin D1及P27~(kipl) mRNA水平,并对数据进行统计学处理。结果 CD4~+ T细胞经免疫磁珠法分选后纯度为(90.00±3.90)%,CD4~+ T细胞培养存活百分率达(92.50±4.60)%。寻常型银屑病患者外周血CD4~+ T细胞Cyclin A、Cyclin D1水平分别为(27.60±3.80)%、(14.70±3.20)%,mRNA水平分别为0.56±0.14、1.37±0.39,与健康对照组(13.50±3.70)%、(7.80±2.00)%和(0.31±0.12)、(0.93±0.35)比较均明显升高,差异有统计学意义(P分别为0.002、0.037和0.008、0.043)。寻常型银屑病患者外周血CD4~+ T细胞P27~(kipl)蛋白和mRNA分别为(23.50±3.60)%和(0.17±0.02),均低于健康对照组的(36.80±5.60)%和(0.33±0.05),差异有统计学意义(P分别为0.007、0.001)。与空白对照组CD4~+ T细胞Cyclin D1蛋白和mRNA表达[分别为(12.30±3.50)%和(1.74±0.39)]比较,LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组表达均下降,分别为(7.20±3.10)%、(8.20±2.50)%、(4.30±1.50)%和(1.11±0.29)、(1.26±0.28)、(0.63±0.20),差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白对照组CD4~+ T细胞P27~(kipl)蛋白[(21.80±3.20)%]比较,LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组蛋白水平均升高,分别为(30.90±5.10)%、(27.60±5.20)%、(43.90±3.00)%,差异均有统计学意义(P分别为0.005、0.006、0.001);与空白对照组CD4~+ T细胞P27~(kipl) mRNA(0.15±0.08)比较,LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组水平均上升,分别为(0.37±0.07)、(0.62±0.09)、(0.99±0.21),差异均有统计学意义(P分别为0.018、0.002、0.003)。空白对照组、LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组组间CD4~+ T细胞Cyclin A蛋白和mRNA表达无显著性差异(均P>0.05)。结论 PI3K与Notch信号途径可协同增强CD4~+ T细胞内正向调节蛋白Cyclin D1水平升高及负向调节蛋白P27~(kipl)水平下降,提示PI3K和Notch信号途径对寻常型银屑病患者外周血CD4~+ T细胞的增殖、活化起着协同调控作用。
2022年04期 v.29;No.145 305-310页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K] [下载次数:257 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ]
- 宋静卉;邢丽媛;王思思;袁胜华;张红梅;
目的 了解成年女性外阴硬化性苔藓(VLS)患者生活质量现状,并探究其影响因素,为改善成年女性VLS患者生活质量提供依据。方法 2019年6月—2021年4月,采用便利抽样法,选择198例河南省人民医院就诊的成年女性VLS患者[年龄(40.98±7.43)岁],采用一般资料调查表、皮肤病生活质量指数量表、女性性功能指数量表、医院用焦虑抑郁量表进行调查,将单因素分析有统计学意义的变量进行多元线性回归分析。结果 成年女性VLS患者生活质量量表得分为(11.31±6.22)分,多元线性回归分析显示性功能障碍、焦虑、抑郁、病程、以往治疗过及绝经是成年女性VLS患者生活质量的主要危险因素(P<0.05)。结论 成年女性VLS患者生活质量较低,护理人员应重点关注患者生活质量的生理及心理健康相关因素并针对性地进行干预和照护,以提高患者生活质量。
2022年04期 v.29;No.145 311-316页 [查看摘要][在线阅读][下载 176K] [下载次数:334 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:1 ] - 范飞翔;黄珍;侯占英;刘坡;
目的 观察浓缩生长因子在稳定期节段型白癜风自体表皮移植中应用的有效性及安全性。方法 纳入65例面部稳定期节段型白癜风患者,随机分为治疗组33例和对照组32例。所有患者均行自体表皮移植,治疗组移植区覆盖自体表皮后,加盖自体浓缩生长因子凝胶膜,然后凡士林纱布覆盖,无菌纱布加压包扎。对照组仅覆盖凡士林纱布。术后两周后,两组患者均行308 nm准分子光照射及外用0.1%他克莫司乳膏。规律随访至术后6个月。结果 治疗后6个月,治疗组、对照组有效率分别为93.94%和75.00%,差异有统计学意义(χ~2=12.44,P=0.040);色素沉着发生率分别为9.09%和31.25%,差异有统计学意义(χ~2=4.99,P=0.026);光晕现象发生率分别为15.15%和37.50%,差异有统计学意义(χ~2=4.20,P=0.040)。治疗组感染发生率为3.03%,对照组感染发生率为6.06%,差异无统计学意义(χ~2<0.01,P=0.978)。结论 浓缩生长因子作为生物敷料在节段型白癜风自体表皮移植中应用安全有效,值得临床推广。
2022年04期 v.29;No.145 317-321页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K] [下载次数:181 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:1 ] - 尚智伟;冯海瑕;赵冰洁;
目的 观察不同深度微针联合外用米诺地尔酊治疗男性雄激素性脱发的临床疗效以及安全性。方法 纳入2020年6月至2021年6月河南科技大学第一附属医院皮肤科门诊男性雄激素性脱发患者90例,随机分为A组(n=30)、B组(n=30)和C组(n=30)。A组仅外用5%米诺地尔酊治疗,B组予0.5 mm深度电动微针针刺联合外用米诺地尔酊治疗;C组予1 mm深度电动微针针刺联合外用米诺地尔酊治疗。治疗12周后观察临床疗效及不良反应情况。结果 治疗12周后,三组患者毛发密度、毛发直径均较治疗前明显改善(均P<0.05),B组和C组均明显优于A组(均P<0.05)。B组和C组患者治疗后自我评估头发生长改善评分均明显优于A组(均P<0.05)。A、B、C三组患者不良反应发生率分别为6.67%、6.67%和26.67%,C组明显高于A组和B组(χ~2=6.92,P=0.031)。结论 0.5 mm深度微针针刺联合外用米诺地尔酊治疗男性雄激素性脱发疗效显著,安全性好,是男性雄激素性脱发患者新的治疗选择。
2022年04期 v.29;No.145 322-326页 [查看摘要][在线阅读][下载 236K] [下载次数:1623 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:1 ] - 李小燕;聂磊;郭伟;李琛;孙波;陈春瑞;程绍航;郑恒;
目的 比较黄金微针射频与超脉冲CO_2点阵激光治疗不同类型面部凹陷性痤疮瘢痕的临床疗效及安全性。方法 选取我院门诊2019年8月—2021年8月诊治的80例凹陷性痤疮瘢痕患者为研究对象,采用随机数字表法分为治疗组和对照组,每组各40例。治疗组采用黄金微针射频治疗;对照组采用超脉冲CO_(2 )点阵激光治疗。比较两组疗效,并按临床亚型(V型、U型和M型)对患者进行分类和评价。结果 两组患者治疗后痤疮瘢痕临床评分量表(ECCA)权重评分均降低,但差异无统计学意义(t=0.46,P=0.644)。两组患者总体有效率比较差异无统计学意义(χ~2=1.89,P=0.176)。两组瘢痕亚型比较,治疗组M型瘢痕疗效较好(t=2.34,P<0.05),对照组V型瘢痕疗效较好(t=-2.36,P<0.05),而两组U型瘢痕疗效无明显差异(t=0.24,P>0.05)。治疗组患者术中疼痛程度、术后红肿期程度评分均低于对照组,痂皮脱落愈合时间短于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 黄金微针射频与CO_2点阵激光均能有效地改善面部凹陷性痤疮瘢痕,其中前者对M型瘢痕疗效显著,后者对V型瘢痕疗效显著。提示临床工作中可对痤疮瘢痕进行亚型分析,进而选择性治疗,必要时可联合治疗,起到协同作用。
2022年04期 v.29;No.145 327-331页 [查看摘要][在线阅读][下载 187K] [下载次数:848 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:1 ] - 刘样满;王国安;张海璐;王润龙;张鑫;王新杰;
目的 探讨耳后蒂皮瓣在耳廓皮肤肿瘤切除后皮肤缺损的修复应用及效果。方法 2019年6月—2021年6月共收治8例耳廓皮肤肿瘤患者,术中扩大切除肿瘤后遗留的皮肤缺损均采用耳后蒂皮瓣修复。结果 8例患者手术后创面均Ⅰ期愈合,瘢痕轻微,皮瓣色泽、质地良好。随访6个月以上,耳廓形状满意。结论 耳廓皮肤肿瘤切除术后,采用耳后蒂皮瓣修复耳廓皮肤缺损,手术简单、效果好,值得临床应用。
2022年04期 v.29;No.145 332-336页 [查看摘要][在线阅读][下载 221K] [下载次数:108 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:2 ] - 谢振谋;黄进梅;刘红芳;曾维英;许巧珍;何政强;符波;薛耀华;
目的 了解广州及周边地区浅部真菌病病种及其致病菌种的构成与分布情况。方法 对2013年1月至2020年12月来南方医科大学皮肤病医院就诊并且真菌培养鉴定阳性的4 018例病例进行病种及致病菌分析。结果 4 018例浅部真菌病病种前三位依次是甲真菌病2 353例(58.00%)、足癣546例(13.46%)、股癣319例(7.86%);致病真菌前三位分别是红色毛癣菌2 197株(54.15%),念珠菌1 161株(28.62%),须癣毛癣菌316株(7.79%);男性体癣、股癣、头癣和足癣的比例均高于女性(均P<0.05),而女性甲真菌病的比例高于男性(χ~2=189.23,P<0.05)。结论 广州及周边地区浅部真菌病及致病菌谱的分布大体符合国内的流行趋势,主要致病菌为红色毛癣菌,0~10岁年龄段是头癣和面癣的发病高峰。临床应重视以上特点,有针对性地为浅部真菌病的防治提供指导。
2022年04期 v.29;No.145 337-341页 [查看摘要][在线阅读][下载 166K] [下载次数:389 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:1 ] - 王明;田歆;陆原;王霞;钟萍;柴宝;王鹏;黄春艳;黄长征;
目的 观察CO_2点阵激光联合5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗面部光线性角化病的临床疗效与安全性。方法 采用开放性、非对照性临床研究,对15例面部光线性角化病患者进行CO_2点阵激光联合ALA-PDT治疗,共治疗1~5次,随访1年,观察疗效及安全性。结果 2例患者经过1次治疗后获得完全缓解,4例2次治疗后完全缓解,9例3~5次治疗后完全缓解,随访12个月均无复发。3例报告美容效果极好,7例报告美容效果良好,5例报告美容效果一般。治疗过程中,有11例患者轻微疼痛,4例明显疼痛。结论 CO_2点阵激光联合ALA-PDT治疗面部光线性角化病有效,美容效果好。
2022年04期 v.29;No.145 342-346页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K] [下载次数:197 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:1 ]